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技術文章

超微量分光光度計怎么檢查性能

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超微量分光光度計作為常用的核酸、蛋白等生物大分子的定量和表征工具,廣泛應用于生命科學和生物制藥等領域,用戶僅需微量樣品即可快速獲得濃度及吸光度結果。然而在日常使用中,一些用戶會對測量結果有疑慮,尤其是當測量結果與預估的結果出現較大差異,或與使用其他方法的定量結果有差異時,用戶往往會懷疑設備出現問題或故障。其性能檢查是確保儀器準確性和可靠性的重要步驟,以下是對超微量分光光度計性能檢查的一些建議:


一、檢查前的準備

1、確保儀器處于穩定狀態:檢查儀器是否放置平穩,避免震動和干擾。

2、檢查光源:確保光源(如氙氣閃光燈)正常工作,無閃爍或亮度不均現象。

3、檢查檢測器:確保檢測器靈敏度高,能夠準確檢測微弱光信號。

4、校準儀器:使用標準溶液(如重鉻酸鉀標準溶液)進行校準,確保儀器測量結果的準確性。


二、性能檢查

1、標準品測量

常用的標準品可使用BSA或核酸標準品,可從各試劑廠家購買,或使用如BCA定量試劑盒,QUBIT核酸定量試劑盒中的標準品。請注意標準品一定要在效期之內,且保存得當(通常低溫)。也可以使用設備廠家提供的小分子化合物標準品,如Implen提供的PHP標準品。標準品是有等級區分的,通常附帶有檢定證書的標準品,標稱濃度會更準確。    特別指出的是,使用未知濃度的樣品,來評估不同設備的測量結果,并以其中一臺作為基準,判定另外一臺的準確性,是錯誤的。

2、重復性測量

在缺乏標準品,或標準品由于保存不當狀態已存疑時,可使用未知濃度樣品做重復性測試。這可以判斷設備的穩定性,以排除一些潛在問題,如樣品臺損壞、樣品的非均質,成分干擾等。雖然不能確定準確性誤差,但重復性很好的設備,很大幾率是沒有大問題的。當然,這需要結合您的允差要求,綜合考量。

3、梯度稀釋測量

使用已知濃度或未知濃度的樣品,均可進行梯度稀釋測量,以驗證設備的線性穩定性。使用設備的標準曲線功能可便捷地完成此項測試,并給出線性回歸。當梯度稀釋的R2趨近于1,設備的線性可滿足廣泛的動態范圍內的測量要求,同時也可反映設備的良好狀態。需要注意的是,梯度稀釋時一定要選擇定期校準過的,準確性好的移液器,且正確操作。

4、基線穩定性測量

 光源和CCD檢測器,作為設備的核心組件,其穩定性對于設備而言是非常重要的,而基線測量可以很好地反映這些部件的狀態。使用水(或空氣)作為空白,并且用水(或空氣)作為樣品,做多次重復測量,如果吸光值的漂移很小,通常可反映設備的光學系統組件狀態正常。


三、性能檢查后的處理

1、記錄檢查結果:詳細記錄各項性能檢查的結果和數據,以便后續分析和比較。

2、分析檢查結果:對檢查結果進行分析和評估,判斷儀器是否滿足使用要求。

3、調整或校準儀器:根據檢查結果,對儀器進行調整或校準,確保儀器處于最佳工作狀態。

4、制定維護計劃:根據儀器的使用情況和性能檢查結果,制定定期維護和保養計劃,延長儀器的使用壽命和保持其準確性。


超微量分光光度計的性能檢查是確保其準確性和可靠性的重要步驟。通過全面的性能檢查,可以及時發現并解決問題,確保儀器在科研和實驗中的準確性和可靠性。

TEL:18016231680

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