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Countstar細胞計數儀是一款高性能的實驗設備,旨在幫助實驗人員快速、準確地進行細胞計數和活力評估。為了確保您能夠正確地使用Countstar細胞計數儀,并獲得最佳的實驗結果,以下是一份詳細的使用指南和注意事項。
一、準備工作
1、連接電源與設備:確保Countstar細胞計數儀已經正確連接電源,并且設備處于開啟狀態。
2、連接電腦:確保Countstar細胞計數儀已經連接到電腦,并且安裝了相關的驅動程序和軟件。
3、清潔工作區域:確保實驗環境干凈整潔,避免污染對實驗結果的影響。
4、準備實驗材料:包括移液器、細胞懸液、染液和計數板等。
二、樣品處理
1、制備樣品:將待檢測的細胞樣品均勻懸浮在培養基中。
2、消毒計數室:取出Countstar細胞計數儀的計數室蓋子,并用70%酒精消毒,以防止交叉污染。
3、無菌操作:避免細菌和其他污染物的干擾。
4、細胞懸液處理:避免氣泡和混濁物的產生,以確保計數結果準確。
三、開始計數操作
1、打開軟件:打開Countstar細胞計數軟件,并選擇“New Experiment"。
2、選擇計數模式:在彈出的窗口中,根據實驗需求選擇合適的計數模式,如細胞計數、活細胞計數等。
3、加入樣品:將計數室蓋子上的樣品滴到計數室的中心位置,然后輕輕蓋上計數室蓋子。確保樣品量適中,避免溢出或過少。
4、開始計數:點擊軟件界面上的“Count"按鈕,開始計數。Countstar細胞計數儀將利用先進的光學成像技術和智能圖像識別技術進行快速準確的自動化檢測。
5、查看結果:等待Countstar細胞計數儀完成計數,并在軟件界面上顯示結果。結果通常包括細胞總數、活細胞數、死細胞數等詳細數據。
四、臺盼藍染色法
1、原理:正常的活細胞,胞膜結構完整,能夠排斥臺盼藍。而喪失活性或細胞膜不完整的細胞,其細胞膜通透性增加,可被臺盼藍染成藍色。
2、優勢:操作簡單,成本低廉。適用于大多數常見細胞類型,建議活率80%以上的樣本采用此方法檢測。
五、清潔與保養
1、清洗與消毒:計數室使用后,應立即清洗和消毒,以防止交叉污染。
2、定期檢查:定期檢查和清潔Countstar細胞計數儀的外殼、計數室蓋子等部分,確保設備處于良好狀態。
3、保持干燥與整潔:注意保持Countstar細胞計數儀的干燥和整潔,避免灰塵和液體進入設備內部。
4、避免碰撞:計數儀放置于平穩無晃動的實驗臺,盡量避免細胞計數儀受到碰撞或振動,以免損壞內部零部件。
六、注意事項
1、樣本檢測時間:樣本檢測必須在樣品注入測量槽后盡快完成,以避免細胞活性下降或樣品變質。
2、細胞染色:對于活細胞計數,可以使用臺盼藍等染料對細胞進行染色,以便區分活細胞和死細胞。但需要注意染料的濃度和染色時間,以避免對細胞造成損傷。
3、原代細胞處理:如遇到原代培養的細胞,建議先用PBS或HANKS液清洗一遍后,再用PBS或HANKS液重懸檢測,以減少原代組織細胞碎片背景的干擾。
Countstar細胞計數儀的使用需要遵循一定的步驟和注意事項,以確保實驗的準確性和可靠性。同時,定期的清潔與保養也是保持設備性能穩定的重要措施。