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技術(shù)文章

thermo賽默飛QubitFlex熒光計可以做哪些實驗?

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賽默飛Qubit™ Flex熒光計的功能。這是一款非常受歡迎的專業(yè)型核酸和蛋白定量儀器,其核心優(yōu)勢在于高通量、高精度和專一的檢測。簡單來說,Qubit Flex熒光計主要用于對DNA、RNA、microRNA、蛋白質(zhì)等生物分子進行精確定量。它無法像酶標儀那樣進行復雜的細胞學或生化實驗,但在定量方面,它比普通紫外分光光度計(如NanoDrop)更準確、更靈敏。


一、賽默飛QubitFlex熒光計核心功能:精確定量

與通過吸光度(A260)測算的儀器不同,Qubit Flex使用熒光染料技術(shù),這些染料只與特定的目標分子(如雙鏈DNA)結(jié)合并發(fā)光,因此幾乎不受鹽、溶劑、游離核苷酸或降解物(如單鏈核酸)的干擾,結(jié)果非常可靠。

1、核酸定量:

dsDNA (雙鏈DNA):這是常用的功能,用于定量下一代測序(NGS)文庫、PCR產(chǎn)物、質(zhì)粒DNA、基因組DNA等。準確性對NGS文庫的 pooling 至關(guān)重要。

ssDNA (單鏈DNA):定量用于測序的單鏈DNA文庫。

RNA:定量用于轉(zhuǎn)錄組學分析(如RNA-Seq)、qRT-PCR的高質(zhì)量RNA樣品。

microRNA:專門定量低濃度的microRNA樣品,這對于miRNA研究非常重要。

2、蛋白質(zhì)定量:

使用特定的蛋白質(zhì)熒光染料,精確定量溶液中的蛋白質(zhì)濃度。這對于需要精確蛋白上樣量的實驗(如Western Blot、蛋白質(zhì)色譜)非常有用。


二、Qubit Flex 的核心特點和優(yōu)勢

除了基礎(chǔ)的定量功能,Qubit Flex之所以叫“Flex"(靈活),是因為它擁有以下突出特點:

1、高通量:

支持8聯(lián)排管,一次最多可以檢測8個樣品,非常適合需要處理大量樣品的實驗室,如核心測序平臺、基因檢測公司等,大大提升了效率。

2、出色的靈敏度和檢測范圍:

靈敏度高,僅需1-20 μL的微量樣品。

可以檢測非常低濃度的樣品(如低至10 pg/μL的DNA),這是普通紫外分光光度計無法做到的。

3、自動化與信息化:

大尺寸觸摸屏界面,操作直觀。

實驗結(jié)果可以直接導出數(shù)據(jù)表或生成PDF報告,方便記錄和追溯。

內(nèi)置條形碼掃描器,可以直接掃描樣品管上的條碼,將樣品信息與檢測數(shù)據(jù)自動關(guān)聯(lián),極大減少了人為錯誤,特別符合GLP/GMP實驗室對數(shù)據(jù)完整性的要求。

4、預編程實驗程序:

儀器內(nèi)置了所有常用的檢測程序(如dsDNA HS, RNA HS, Protein等),用戶只需選擇對應的 assay,儀器會自動設(shè)置好參數(shù)。


三、典型應用場景

1、下一代測序(NGS):在構(gòu)建完測序文庫后,必須對每個文庫進行精確定量,以確保不同文庫以等摩爾量混合進行上機測序。這是Qubit Flex最關(guān)鍵的應用場景。

2、熒光定量PCR(qPCR, dPCR):在運行qPCR實驗前,精確測定模板DNA或cDNA的濃度,以確保上樣量的準確性,獲得可靠的Ct值。

3、蛋白質(zhì)組學:在Western Blot、蛋白質(zhì)純化等實驗前,精確測定蛋白質(zhì)樣品濃度。

4、質(zhì)量控制(QC):作為實驗室樣品質(zhì)量控制的環(huán)節(jié),確保用于下游實驗的樣品在濃度上符合要求。


Qubit Flex熒光計是分子生物學和基因組學實驗室中用于樣品精確定量和質(zhì)量控制的“黃金標準"儀器之一。 如果您的工作流程涉及大量需要精確濃度的核酸或蛋白質(zhì)樣品,那么Qubit Flex是一個非常理想的選擇。

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