伯樂Bio-Rad CFX Opus 96實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀實(shí)驗(yàn)所需的耗材和試劑。這臺(tái)儀器是qPCR實(shí)驗(yàn)的核心設(shè)備，要完成一個(gè)完整的實(shí)驗(yàn)，需要以下一系列的耗材和試劑。我們可以將其分為三大部分：核心耗材、實(shí)驗(yàn)試劑、輔助耗材。

一、伯樂CFX OPUS96實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀核心耗材

這些是直接用于儀器運(yùn)行和信號(hào)檢測(cè)的消耗品。

1、qPCR反應(yīng)板/八聯(lián)管

（1）96孔光學(xué)反應(yīng)板：這是常用的耗材，專為CFX Opus 96的光學(xué)系統(tǒng)設(shè)計(jì)。板子必須是光學(xué)平蓋或使用光學(xué)封板膜，以確保激光能準(zhǔn)確激發(fā)熒光并接收信號(hào)。

（2）透明封板膜：用于密封96孔板，防止實(shí)驗(yàn)過程中液體蒸發(fā)和交叉污染。務(wù)必選擇與您的儀器兼容的高質(zhì)量封板膜。

（3）八聯(lián)管與管蓋：如果您不想使用整塊板，也可以使用獨(dú)立的八聯(lián)管和相應(yīng)的透明管蓋。這對(duì)于優(yōu)化反應(yīng)條件或樣本量少時(shí)非常方便。

重要提示：伯樂儀器對(duì)耗材有優(yōu)化建議。使用伯樂原廠或推薦品牌的耗材可以獲得良好的光學(xué)性能和熱傳導(dǎo)效率。

2、校準(zhǔn)板

CFX Opus 96通常需要一塊光學(xué)校準(zhǔn)板。這臺(tái)儀器在出廠時(shí)已校準(zhǔn)，但根據(jù)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作程序，可能需要定期或在移動(dòng)儀器后進(jìn)行校準(zhǔn)。請(qǐng)參考儀器手冊(cè)確認(rèn)您是否需要以及何時(shí)需要使用。

二、伯樂CFX OPUS96實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀實(shí)驗(yàn)試劑

這些是進(jìn)行qPCR化學(xué)反應(yīng)所必需的生化成分。

1、PCR預(yù)混液

這是核心試劑，通常以2x濃度的形式提供，包含了進(jìn)行高效、特異性PCR擴(kuò)增所需的所有成分（除了引物、探針和模板DNA/cDNA）。

（1）主要成分包括：

熱啟動(dòng)DNA聚合酶：提高反應(yīng)特異性和靈敏度。

dNTPs：合成DNA的原料。

MgCl?：聚合酶必需的輔因子。

緩沖鹽：提供良好的反應(yīng)pH環(huán)境。

穩(wěn)定劑和增強(qiáng)劑。

（2）選擇類型：

SYBR Green預(yù)混液：適用于使用SYBR Green染料法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。染料會(huì)嵌入所有雙鏈DNA中發(fā)出熒光。

TaqMan探針預(yù)混液：適用于使用水解探針法（如TaqMan）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。這種預(yù)混液針對(duì)探針法的5‘-3’外切酶活性進(jìn)行了優(yōu)化。

2、物和探針

（1）引物：一對(duì)特異性引物，用于擴(kuò)增您的目標(biāo)基因。

對(duì)于SYBR Green法，只需要一對(duì)引物。對(duì)于TaqMan探針法，除了引物，還需要一條熒光標(biāo)記的探針。

（2）探針：通常是兩端分別標(biāo)記有報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)的寡核苷酸探針。

3、模板核酸

（1）DNA：用于基因分型或病原體檢測(cè)。

（2）cDNA：由RNA經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄 反應(yīng)合成，用于基因表達(dá)分析。

4、無核酸酶水

用于稀釋和配制反應(yīng)體系，確保不會(huì)引入外源核酸酶降解您的試劑和樣本。

5、陽性對(duì)照和陰性對(duì)照

（1）陽性對(duì)照：含有已知目標(biāo)序列的模板，用于驗(yàn)證整個(gè)實(shí)驗(yàn)體系的有效性。

（2）無模板對(duì)照：用水代替模板，用于檢測(cè)試劑或環(huán)境中是否存在污染。

6、標(biāo)準(zhǔn)品

如果您需要進(jìn)行定量，則需要一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品（例如，含有目標(biāo)基因的質(zhì)粒DNA或合成寡核苷酸梯度稀釋液），用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

三、輔助耗材與工具

這些是實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備過程中物品。

1、移液器和無菌帶濾芯吸頭：用于精確移取液體，帶濾芯的吸頭可以防止氣溶膠污染和交叉污染。

2、渦旋混合儀和微型離心機(jī)：用于混勻試劑和離心收集管壁上的液滴。

3、冰盒：用于在準(zhǔn)備反應(yīng)時(shí)保持試劑的低溫狀態(tài)。

4、無塵紙/酒精：用于清潔工作臺(tái)面，防止污染。